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系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體的檢測(cè)

發(fā)布時(shí)間： 2016-07-11 18:13:36 來(lái)源：健康族

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系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體的檢測(cè)

中華皮膚科雜志1999年第4期第32卷短篇論著

作者：孟慶功袁國(guó)華

單位：100853北京,解放軍總醫(yī)院風(fēng)濕科

抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體(ANCA)是針對(duì)中性粒細(xì)胞和單核細(xì)胞胞漿蛋白的自身抗體。該抗體被普遍認(rèn)為是系統(tǒng)性血管炎的標(biāo)記抗體。間接免疫熒光法(IIF)檢測(cè)ANCA有3種熒光圖譜,胞漿型(c-ANCA)、核周型(p-ANCA)和非典型型(a-ANCA)。為探討ANCA與系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)的關(guān)系及其臨床意義,我們采用IIF法對(duì)63例SLE患者血清進(jìn)行檢測(cè)。

一、材料與方法

1.對(duì)象:SLE患者63例,為本科住院患者,年齡12～62歲,平均30歲,病程1個(gè)月至25年,平均3.8年。所有患者均符合美國(guó)風(fēng)濕病協(xié)會(huì)1982年的診斷標(biāo)準(zhǔn)。另選擇42例正常健康人作為對(duì)照。

2.ANCA檢測(cè):從正常獻(xiàn)血員抗凝血中分離出中性粒細(xì)胞,用細(xì)胞離心涂片機(jī)制備抗原片,1000r/min離心4min,無(wú)水乙醇4℃固定5min,吹干。標(biāo)本血清用0.01mol/LPBS1∶10稀釋加在抗原片上,37℃孵育30min,PBS洗3次,每次5min,吹干。加1滴羊抗人IgG熒光抗體(軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院提供,用時(shí)1∶40稀釋)于抗原片上,同上37℃孵育30min,PBS洗3次,吹干。加緩沖甘油封片,熒光顯微鏡下觀察結(jié)果。中性粒細(xì)胞胞漿出現(xiàn)特異性熒光者為c-ANCA,細(xì)胞核周圍出現(xiàn)特異性熒光者為p-ANCA,不典型熒光著色者為a-ANCA,胞漿及核周圍均無(wú)特異熒光染色者為陰性。每例標(biāo)本均進(jìn)行2次以上檢測(cè)證實(shí)。

3.抗核抗體(ANA)檢測(cè):以小鼠肝切片為底物,采用IIF?？筪sDNA抗體采用放射免疫分析法檢測(cè)?？笶NA抗體采用對(duì)流免疫電泳法檢測(cè)。

4.統(tǒng)計(jì)學(xué)處理:采用χ2檢驗(yàn)。

二、結(jié)果

1.42份正常健康人血清均為陰性,63例SLE患者血清26例ANCA陽(yáng)性(41.3％),其中p-ANCA15例,a-ANCA11例。

2.在ANCA陽(yáng)性組,漿膜炎及多系統(tǒng)受累的SLE患者明顯高于陰性組,而肝損害、肺部病變、皮損及心電圖異常在兩組之間沒(méi)有差異(見(jiàn)表1)?？筪sDNA抗體陽(yáng)性及中度以上貧血(血紅蛋白＜90g/L)的SLE患者在ANCA陽(yáng)性組明顯高于陰性組(見(jiàn)表2)。

表1ANCA與SLE臨床表現(xiàn)的關(guān)系[例數(shù)(％)]

臨床表現(xiàn)ANCA陽(yáng)性(26例)ANCA陰性(37例)χ2值P值蝶形紅斑13(50.0)16(43.2)0.281＞0.05盤(pán)狀紅斑及紫癜19(73.1)25(67.6)0.220＞0.05口腔潰瘍11(42.3)17(45.9)0.082＞0.05腹水4(15.4)5(13.5)0.044＞0.05漿膜炎13(50.0)6(16.2)8.274＜0.01心電圖異常6(23.1)14(37.8)1.534＞0.05肺部病變4(15.4)5(13.5)0.044＞0.05肝臟損害6(23.1)3(8.1)2.794＞0.05多系統(tǒng)受累14(53.8)9(24.3)5.741＜0.05表2ANCA與SLE其它實(shí)驗(yàn)室檢查的關(guān)系[例數(shù)(％)]

實(shí)驗(yàn)室檢查ANCA陽(yáng)性(26例)ANCA陰性(37例)χ2值P值24h蛋白尿＞0.15g/L22(84.6)30(81.1)0.132＞0.05血小板＜100×109/L5(19.2)8(21.6)0.053＞0.05白細(xì)胞＜4.0×109/L10(38.5)15(40.5)0.028＞0.05血紅蛋白＜110g/L21(80.8)22(59.5)3.200＞0.05＜90g/L12(46.2)8(21.6)4.241＜0.05血沉＞20mm/lh22(84.6)31(83.8)0.008＞0.05ANA陽(yáng)性26(100)33(89.2)3.000＞0.05坑ds-DNA抗體陽(yáng)性10/108/17(47.1)7.941＜0.01抗Sm/抗陽(yáng)性5(19.2)11(29.7)0.888＞0.05抗SSA/抗SSB陽(yáng)性10(38.5)20(54.1)1.488＞0.05三、討論

deBandt等[1]在11例SLE患者血清中檢測(cè)出1例p-ANCA,4例a-ANCA。Lawton和Lee[2]在46例SLE患者中檢測(cè)出14例p-ANCA。而我們?cè)?3例SLE患者中發(fā)現(xiàn)15例p-ANCA,11例a-ANCA。在SLE患者血清中未見(jiàn)有c-ANCA的報(bào)道。這些不同的熒光圖型是由多種抗原成分所致。c-ANCA的主要抗原成分為蛋白酶3(PR3),p-ANCA的主要抗原成分為髓過(guò)氧化物酶(MPO),a-ANCA的抗原成分目前尚不清楚。Afelera等[3]的研究發(fā)現(xiàn),抗中性粒細(xì)胞胞漿抗原和核抗原的免疫應(yīng)答不同,本文結(jié)果也未發(fā)現(xiàn)ANA與ANCA有相關(guān)性。

研究認(rèn)為,ANCA能刺激活性氧離子(ROS)的釋放,引起組織損傷[4]。對(duì)比ANCA陽(yáng)性和陰性SLE患者的臨床資料,在ANCA陽(yáng)性患者中漿膜炎發(fā)生率為50％,而在ANCA陰性患者中僅為16.2％,二者差異有顯著性(P＜0.01)。在ANCA陽(yáng)性組,多系統(tǒng)受累(53.8％)及中度以上貧血者(46.2％)均明顯高于ANCA陰性組(P＜0.05)，提示ANCA與SLE的病情活動(dòng)有關(guān)。Egner等[5]也觀察到ANCA在SLE發(fā)病或病情復(fù)發(fā)時(shí)升高。有人發(fā)現(xiàn),活動(dòng)性狼瘡腎炎患者血清中ANCA陽(yáng)性率明顯高于非活動(dòng)性狼瘡腎炎患者。而血清抗dsDNA抗體在活動(dòng)性狼瘡腎炎患者血清中也普遍升高。本文結(jié)果顯示,在ANCA陽(yáng)性組抗dsDNA抗體陽(yáng)性率明顯高于ANCA陰性組(P＜0.01)，推測(cè)ANCA可能與活動(dòng)性狼瘡腎炎有關(guān)。

參考文獻(xiàn)

1deBandtM,MeyerO,HaimT,etal.Antineutrophilcytoplasmicantibodiesinrheumatoidarthritispatients.BrJRheumatol,1996,35:38－43.

2LawtonJWM,LeeSS.Antineutrophilcytoplasmicantibody(ANCA)insystemiclupuserythematosus(SLE).AmJKidneyDis,1991,2:200.

3AfeleraA,SebastianiGD,GaleazziM,etal.Antineutrophilcytoplasmicantibodiesinsynovialfluidandinserumofpatientswithrheumatoidarthritisandothertypesofsynovitis.Rheumatol,1996,23:10－15.

4EwertBH,JennetteJC,FalkRJ.Thepathogenicroleofantineutrophilcytoplasmicautoantibodies.AmJKidneyDis,1991,2:188－195.

5EgnerW,ChapelHM.Titrationofantibodiesagainstneutrophilcytoplasmicantigensisusefulinmonitoringdiseaseactivityinsystemicvasculitides.ClinExpImmunol,1990,82:244.

(收稿：1998－08－03修回：1998－12－21)

（責(zé)任編輯：zxwq）

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