鼻咽癌放射治療前測定血管內皮生長因子的意義

關鍵詞鼻咽癌
［摘要］目的：于放療前后檢測鼻咽癌患者血清中血管內皮生長因子和β2微球蛋白的水平，探討其變化及臨床意義。方法：采集58例鼻咽癌患者和24名健康體檢者血清，應用酶聯(lián)免疫吸附法測定VEGF水平，用時間分辨熒光免疫分析（timeresolvedfluoroimmunoassay，TRFIA）方法測定β2微球蛋白水平，并對其變化及其與臨床分期和患者生存期的關系進行分析。結果：鼻咽癌患者治療前血清VEGF水平為ng/L，稍高于健康體檢者的ng/L，但差異無統(tǒng)計學意義。鼻咽癌TNM分期T4和臨床分期Ⅳa患者治療前血清VEGF水平較高。治療前血清VEGF水平＆gt;267。3ng/L者，無遠處轉移生存期短。β2微球蛋白水平高的患者，中位生存期短，但差異無統(tǒng)計學意義。結論：鼻咽癌治療前VEGF水平明顯升高提示預后不良。
［關鍵詞］鼻咽癌;放療;血管內皮生長因子;β2微球蛋白
Significanceofserumvascularendothelialgrowthfactortestbeforeradiotherapyinpatientswithnasopharyngealcarcinoma
ABSTRACTObjective：Tostudythechangesofserumvascularendothelialgrowthfactor（VEGF）andbeta2microglobulinlevelsbeforeandafterradiotherapyin58patientswithnasopharyngealcarcinoma（NPC），andtoelucidatetheclinicalsignificanceofVEGFandbeta2microglobulintestbeforeradiotherapy。Methods：SerumVEGFlevelwasmeasuredbysandwichELISAin58patientswithNPCand24healthyindividuals，andtheserumbeta2microglobulinwasassayedwithtimeresolvedfluoroimmunoassay。Results：TheserumVEGFlevelinpatientswithNPCwas（174。0±130。0）ng/L，higherthan（134。1±66。6）ng/Lofthehealthysubjects，butthedifferencewasnotsignificant（P＆gt;0。05）。TheserumVEGFlevelwashigherinT4andⅣapatientswithNPC。NosignificantdifferencesinthelevelsofserumVEGFwerefoundamongvariousNclassificationsinthepatientswithNPC。PatientswiththeserumVEGFlevelhigherthan267。3ng/L（mean+2softheserumVEGFlevelinthehealthyindividuals）hadashortermetastasisfreesurvivaltime（P＆lt;0。05）。Althoughthepatientswithhighbeta2microglobulinlevelhadashortersurvivaltime，thedifferencewasnotsignificant。Conclusion：TheNPCpatientswithhighserumVEGFlevelhaveapoorprognosis。

KEYWORDSnasopharyngealcarcinoma;radiotherapy;vascularendothelialgrowthfactor;beta2microglobulin
血管內皮生長因子對血管內皮細胞的增殖、遷移及血管的構建有較強的調控作用，能增加血管的通透性，是促進腫瘤生長和轉移的重要因子。我們采用酶聯(lián)免疫吸附法（enzymelinkedimmunosorbentassay，ELISA）對58例鼻咽癌患者在放療前后測定血清中VEGF水平，以探討其臨床價值，同時檢測了血清中的β2微球蛋白水平。
1資料與方法
1。1臨床資料我們自2000年1月～2003年12月，選擇病理診斷明確的初治鼻咽癌，肝腎功能正常，B超無肝、腎、腎上腺轉移，胸片無肺轉移，同位素骨掃描無骨轉移的患者進行研究。共58例，男36例，女22例；年齡31～82歲，平均53。1歲。按腫瘤淋巴結轉移分期標準［1］，T16例，T216例，T329例，T47例；N01例，N133例，N221例，N33例；Ⅰ期0例，Ⅱ期12例，Ⅲ期37例，Ⅳa期9例。給予患者70～72Gy放療和2～4次化療；此后給予口服康賽迪0。75g，3次/d，并予中藥益氣扶正為主治療。從放療開始日計算生存期，失訪計入死亡。另有健康體檢者24名（男15名，女9名，平均50。4歲）采血作為正常對照。
1。2觀察方法分別于放療前2周內和放療后3～4周采血，靜脈血混勻后離心10min，存放于－20℃低溫冰箱保存待測。檢測方法采用雙抗體夾心ELISA，VEGF試劑盒為晶美公司產(chǎn)品，在酶標儀450nm處測量，測量值為相當于VEGF165的量。腫瘤患者血清還采用芬蘭WallacOy公司的AutoDELFIATMβ2微球蛋白試劑盒，用時間分辨熒光免疫分析（timeresolvedfluoroimmunoassay，TRFIA）方法測定其β2微球蛋白水平。
1。3統(tǒng)計學方法使用SPSS10。0軟件進行處理，計量資料治療前后采用配對t檢驗，組間比較用分組t檢驗，中位生存期比較用χ2檢驗，預后危險因素用Cox回歸分析，生存分析用KaplanMeier法。
2結果
2。1VEGF檢測結果健康體檢者VEGF平均水平為134。1ng/L，與試劑盒提供的平均值135ng/L接近；鼻咽癌患者治療前血清VEGF平均水平為174。0ng/L，較健康體檢者高40ng/L，但差異無顯著性。放療后有4例患者未進行檢測，其中2例失訪，1例未按時采血，1例尚未檢測。放療后鼻咽癌患者血清VEGF平均水平較放療前有所降低，差異有統(tǒng)計學意義。見表1。
2。2鼻咽癌患者放療前血清VEGF水平與分期的關系T4、N3及Ⅳa患者的平均VEGF水平較高，將患者進行合并后，T4與T13，Ⅳa與Ⅱ、Ⅲ期患者相比放療前血清VEGF水平高，差異有統(tǒng)計學意義，N01、N2與N3比較，差異無統(tǒng)計學意義。見表2。
2。3鼻咽癌患者放療前血清VEGF水平對生存期的影響按健康體檢者VEGF水平的平均值加2倍標準差，即267。3ng/L作為VEGF異常升高的標準，將鼻咽癌患者分為低VEGF組和高VEGF組，并將T12、T34合并，N01、N23合并，進行Cox分析，結果僅VEGF水平對無遠處轉移生存期的影響達顯著性水平。表明VEGF水平是鼻咽癌治療后遠處轉移的獨立預后因素。見表3。
表1鼻咽癌患者放療前后血清VEGF水平
Tab1SerumVEGFlevelinpatientswithNPCbeforeandaftertreatment
P＆lt;0。05，vsbeforetreatment
表2鼻咽癌患者放療前血清VEGF水平與臨床分期
Tab2RelationofSerumVEGFlevelandTNMstaginginpatientswithNPC
表358例鼻咽癌Cox多因素分析結果
Tab3ResultsofCoxanalysisin58patientswithNPC
KaplanMeier生存分析發(fā)現(xiàn)，放療前高VEGF組的10例患者無遠處轉移生存期短，與低VEGF組比較有顯著性差異。見圖1。
圖1鼻咽癌放療前不同血清VEGF水平患者生存率
Fig1NonmetastasissurvivalcurvesaccordingtoVEGFlevelsinpatientswithNPC
2。4放療后血清VEGF水平對生存期的影響盡管放療后鼻咽癌患者血清VEGF平均水平較放療前降低，差異有顯著性，但有近1/3的患者放療后血清VEGF水平較放療前升高，6例患者升高50%以上，生存分析未發(fā)現(xiàn)他們與其余患者生存期差異有顯著性。6例患者放療前血清VEGF平均水平為111。8ng/L，放療后平均為221。4ng/L。僅1例為374。6ng/L，超過267。3ng/L，該患者于治療后4個月出現(xiàn)肝轉移。包括該例患者，放療后共5例患者血清VEGF水平高于267。3ng/L，其中位無遠處轉移生存期為4。1個月，低于其他患者的16。1個月。
2。5放療前血清β2微球蛋白水平與臨床分期的關系按試劑盒提供的標準，60歲以下＆gt;2。0mg/L，60歲以上＆gt;2。6mg/L為異常，10例患者β2微球蛋白水平升高，其中位無瘤生存期為9。9個月，稍低于β2微球蛋白水平正?；颊叩?5。2個月，但差異無顯著性，表明β2微球蛋白水平與淋巴結轉移和臨床分期均無關。見表4。
表4鼻咽癌患者放療前血清β2微球蛋白水平與臨床分期
Tab4Relationofserumbeta2microglobulinlevelandTNMstaginginpatientswithNPC
3討論
近年研究顯示，血管生成是腫瘤生長和轉移的關鍵步驟，原發(fā)腫瘤的生長需要有新血管的不斷生成，轉移灶生長至一定大小后也需要新的血管才能繼續(xù)生長。VEGF在腫瘤的血管生成和轉移發(fā)生中起著重要作用［2］。本研究顯示，T4和Ⅳa鼻咽癌患者的治療前血清VEGF水平較高，高VEGF水平組無遠處轉移生存期短。與Qian等［3］報道的轉移性鼻咽癌患者的血清VEGF水平明顯高于無轉移者的結果相似。GuangWu等［4］報道轉移性鼻咽癌患者，活檢標本的微血管密度和VEGF表達水平明顯高于無轉移患者的標本。說明VEGF水平與鼻咽癌的轉移密切相關。
有研究顯示，原發(fā)灶的治療可能會使血清VEGF水平升高而促進轉移灶的生長［5］。我們的研究顯示，放療后有1/3的患者血清VEGF水平較放療前升高，6例鼻咽癌患者血清VEGF水平較放療前升高50%以上。但5例VEGF水平仍在健康對照組的范圍內，僅1例異常升高達374。6ng/L，該患者于治療后4個月出現(xiàn)肝轉移。故鼻咽癌放療后血清VEGF水平輕度升高，可能多數(shù)是為滿足正常組織修復需要而由正常組織分泌的。異常升高的臨床意義有待積累病例后進一步研究。
本研究顯示，β2微球蛋白水平與臨床分期無關，盡管β2微球蛋白水平升高的患者中位無遠處轉移生存期短，但差異無顯著性。Shiu等［6］報道，盡管在早期、晚期和轉移鼻咽癌患者間，β2微球蛋白水平差異有顯著性，但其在鼻咽癌診斷中的敏感性低。Lee等［7］報道，盡管按國際抗癌聯(lián)合會的TNM分期晚和生存期短的患者中，β2微球蛋白水平較高，但差異無顯著性，故β2微球蛋白水平作為鼻咽癌腫瘤標記物的臨床價值有限。我們認為，由于β2微球蛋白水平尚與腎功能等因素有關，治療前單次檢測鼻咽癌患者β2微球蛋白水平的價值有限。動態(tài)檢測能否作為晚期患者病情進展的參考指標有待進一步研究。
本研究顯示，鼻咽癌作為放療效果較好的腫瘤，盡管放療前全組血清VEGF水平平均值與健康對照組的差異未達顯著性水平，但血清VEGF異常升高的患者無遠處轉移生存期短，是治療后遠處轉移的獨立預后因素，提示該部分患者有潛在轉移或遠處轉移傾向。使用該指標將這部分鼻咽癌患者在放療前找出，給予更強烈的化療；或將腫瘤新生血管作為治療目標靶，給予TNP470、抗VEGF抗體、干擾素α/β治療，能否提高療效值得進一步研究。放、化療后扶正為主的中藥治療中，加入三七、姜黃等抗血管生成成分，是否能提高病人生存期也值得研究。
［參考文獻］
1嚴潔華。徐國鎮(zhèn)。鼻咽癌［A］。見：殷蔚伯，谷銑之主編。腫瘤放射治療學［M］。第3版。北京：中國協(xié)和醫(yī)科大學出版社，2002。537573。
2MaedaK，ChungYS，OgawaY，etal。Prognosticvalueofvascularendothelialgrowthfactorexpressioningastriccarcinoma［J］。Cancer，1996，77（5）：858863。
3QianCN，ZhangCQ，GuoX，etal。Elevationofserumvascularendothelialgrowthfactorinmalepatientswithmetastaticnasopharyngealcarcinoma［J］。Cancer，2000，88（2）：255261。
4GuangWuH，SunagawaM，JieEnL，etal。Therelationshipbetweenmicrovesseldensity，theexpressionofvascularendothelialgrowthfactor（VEGF），andtheextensionofnasopharyngealcarcinoma［J］。Laryngoscope，2000，110（12）：20662069。
5ManiwaY，OkadaM，IshiiN，etal。Vascularendothelialgrowthfactorincreasedbypulmonarysurgeryacceleratesthegrowthofmicrometastasesinmetastaticlungcancer［J］。Chest，1998，114（6）：16681675。
6ShiuW，LeungSF，LeungWT，etal。Expressionofbeta2microglobulinbynasopharyngealcarcinoma［J］。BrJCancer，1992，66（3）：555557。
7LeeJK，TsaiSC，HsiehJF，etal。Beta2microglobulin（beta2M）asatumormarkerinnasopharyngealcarcinoma［J］。AnticancerRes，2000，20（6C）：47654768